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簡要描述:切片過氧亞硝基陰離子檢測試劑盒(ONOO–檢測試劑盒)紅色
產(chǎn)品分類
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詳細(xì)介紹
試劑準(zhǔn)備:
根據(jù)樣本數(shù)量,用純水將O08探針10倍稀釋。充分混勻,備用。
樣本處理:
1. 剛?cè)〉玫男迈r組織樣本用PBS洗凈。
2. 準(zhǔn)確稱取50 mg或100 mg組織樣本,加入500 μl-1 ml勻漿緩沖液A,用勻漿機(jī)/勻漿器充分勻漿。
3. 在100×g,4℃離心5分鐘,取上清備用。
樣本檢測:
1. 在96孔板中加入190微升勻漿上清液、10微升O08探針,用移液器吹打,使之充分混勻。
2. 在37℃避光孵育20-30分鐘。
3. 置于酶標(biāo)儀中,激發(fā)波長為488-535 nm、發(fā)射波長606 nm檢測熒光強(qiáng)度。
蛋白定量:
1. 另取50微升上清勻漿液,用PBS大約稀釋30倍。
2. 取100微升進(jìn)行蛋白定量。
結(jié)果處理:
以熒光強(qiáng)度(RFU)/蛋白濃度(毫克蛋白)表示組織活性氧強(qiáng)度。
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